คุณจะเลือกโคลนได้อย่างไร?

2024 ผู้เขียน: Stanley Ellington | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-16 00:24

เมื่อไหร่ การเลือก NS โคลน ตรวจสอบให้แน่ใจว่ารากนั้นแข็งแรง สีขาว และยื่นออกมาจากอาหารเลี้ยงเชื้ออย่างกระตือรือร้น หากรากมีสีน้ำตาลและเหี่ยวเฉา หรือปรากฏว่าไม่ได้ใช้งาน ให้ใส่กลับเข้าไปแล้วมองหารากที่ดีกว่า

นอกจากนี้ คุณจะโคลนเซลล์เดียวได้อย่างไร

1. นับเซลล์เพื่อใส่ ~16,000 เซลล์ลงในหลุมแรก (A1) ของเพลต 96 หลุมที่มีตัวกลาง 200 µL
2. ลบ 100 µL ออกจากเซลล์ที่มี A1 และผสมกับ B1 ปิเปตขึ้นและลง 3x เพื่อผสมให้เข้ากันก่อนที่จะเอา 100 µL และผสมกับ C1 เป็นต้น

คุณจะเลือกอาณานิคมเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมได้อย่างไร? วางจานไว้ใต้กล้องจุลทรรศน์เพื่อเลือกสุขภาพที่ไม่แตกต่างกัน อาณานิคม . เลือกอาณานิคม โดยใช้ปิเปต P-20 ที่ตั้งค่าไว้ที่ 10ul อย่างระมัดระวัง เลือก NS อาณานิคม โดยไม่ทำลาย อาณานิคม เป็นโสด เซลล์ และโอนลงในจาน 96 หลุมที่มีทริปซิน ปิเปตขึ้นและลงสองสามครั้งเพื่อกระจาย อาณานิคม.

ตามลําดับ คุณใช้ clone cylinder อย่างไร?

โดยใช้ คีมขนาดกลางปลอดเชื้อ หยิบ a กระบอกโคลน . ค่อยๆกดด้านล่างแบนของ กระบอก ลงในจาระบีซิลิโคนที่เรียบแล้วเอาออกโดยการเคลื่อนไหวในแนวตั้งอย่างกะทันหัน หากทำอย่างถูกต้องจะทำให้มีการกระจายของจาระบีที่ด้านล่างของ กระบอก . ตั้งค่า กระบอก เหนืออาณานิคม

คุณจะเลือกโคโลนีสำหรับสายเซลล์ที่เสถียรได้อย่างไร?

โปรโตคอลสำหรับการสร้างเส้นเซลล์ที่เสถียรต้องใช้หลายขั้นตอนดังที่แสดงด้านล่าง:

1. สร้างเส้นโค้งการฆ่าเพื่อกำหนดความเข้มข้นของยาปฏิชีวนะในการคัดเลือกที่เหมาะสมที่สุด
2. ทรานส์เฟกเซลล์ด้วยโครงสร้างพลาสมิดที่ต้องการ
3. เลือกและขยายโคโลนีโพลีโคลนอลที่เสถียร
4. ระบุโคลนเดี่ยวโดยการเจือจางและการขยายตัวอย่างจำกัด