การย่อยอาหารไม่สมบูรณ์คืออะไร?

2024 ผู้เขียน: Stanley Ellington | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-16 00:24

หนึ่ง การย่อยอาหารไม่สมบูรณ์ ระบบมีเพียงช่องเดียวเท่านั้น อาหารไปในช่องเดียวกับของเสียออกมา ราวกับว่าทวารหนักของคุณเป็นช่องเดียวกับปากของคุณ! น้ำเข้าไปและเซลล์พิเศษที่เรียกว่า choanocytes จะกรองเศษอาหารออก

เมื่อพิจารณาถึงเรื่องนี้ เหตุใดการย่อยอาหารไม่สมบูรณ์จึงเกิดขึ้น

การย่อยอาหารไม่สมบูรณ์ เป็นปัญหาที่พบบ่อยเมื่อใช้เอ็นโดนิวคลีเอสจำกัด การย่อยอาหารไม่สมบูรณ์ อาจ เกิดขึ้น เมื่อใช้เอนไซม์มากเกินไปหรือน้อยเกินไป การปรากฏตัวของสารปนเปื้อนในตัวอย่าง DNA สามารถยับยั้งเอนไซม์ได้ ส่งผลให้ การย่อยอาหารไม่สมบูรณ์.

อาจมีคนถามอีกว่า คุณจะปล่อยให้สรุปข้อ จำกัด ได้นานแค่ไหน? *Pro-Tip* ขึ้นอยู่กับการใช้งานและปริมาณของ DNA ในปฏิกิริยา เวลาฟักตัว สามารถ ช่วงตั้งแต่ 45 นาทีถึงค้างคืน สำหรับการวินิจฉัย ย่อย , 1-2 ชั่วโมง เป็น มักจะเพียงพอ สำหรับ ย่อย ด้วย DNA > 1 µg ที่ใช้สำหรับการโคลนนิ่งนั้น เป็น แนะนำว่า คุณย่อย เป็นเวลาอย่างน้อย 4 ชั่วโมง

ในลักษณะนี้ การย่อยที่สมบูรณ์ของ DNA คืออะไร?

ข้อจำกัด การย่อย เป็นกระบวนการตัด ดีเอ็นเอ โมเลกุลเป็นชิ้นเล็ก ๆ ด้วยเอ็นไซม์พิเศษที่เรียกว่า Restriction Endonucleases (บางครั้งเรียกว่า Restriction Enzymes หรือ RE's)

คุณจะย่อยอาหารตามลำดับได้อย่างไร?

โปรโตคอลสำหรับ ตามลำดับ ดีเอ็นเอ การย่อย บ่มปฏิกิริยาที่ การย่อย อุณหภูมิ (ปกติ 37°C) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง หยุด การย่อย โดยการปิดใช้งานความร้อน (65 ° C เป็นเวลา 15 นาที) หรือเพิ่ม EDTA ความเข้มข้นสุดท้าย 10mM นำ DNA กลับมาโดยใช้ชุดการทำให้บริสุทธิ์: แขวนตะกอนใหม่และเจือจาง DNA เป็น 1 µg/ µL