การโคลนกิบสันทำงานอย่างไร

2024 ผู้เขียน: Stanley Ellington | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-16 00:24

NS กิ๊บสันโคลนนิ่ง มาสเตอร์มิกซ์ประกอบด้วยเอ็นไซม์สามชนิดที่แตกต่างกันภายในบัฟเฟอร์เดียว เอนไซม์แต่ละตัวมีหน้าที่เฉพาะและเป็นเอกลักษณ์สำหรับปฏิกิริยา: T5 Exonuclease - สร้างส่วนที่ยื่นออกมาของ DNA 3 สายเดี่ยวโดยการเคี้ยวกลับจากปลาย DNA 5' ชิ้นส่วนดีเอ็นเอเสริมสามารถหลอมรวมเข้าด้วยกันได้ในภายหลัง

เมื่อพิจารณาถึงสิ่งนี้ กิ๊บสันทำงานอย่างไร?

NS กิ๊บสัน วิธีการ Assembly® เป็นกระบวนการโคลนนิ่งที่ช่วยให้สามารถโคลนชิ้นส่วนตั้งแต่สองชิ้นขึ้นไปโดยไม่จำเป็นต้องมีการจำกัดการย่อยด้วยเอ็นไซม์แบบจำกัดหรือไซต์การจำกัดที่เข้ากันได้ แต่จะรวมส่วนปลายที่ทับซ้อนกันที่ผู้ใช้กำหนดไว้ในส่วนย่อยเพื่อให้เชื่อมต่อกันอย่างราบรื่นของส่วนย่อยที่อยู่ติดกัน

ในทำนองเดียวกัน Gibson Assembly Master Mix คืออะไร? NS Gibson Cloning Master Mix ประกอบด้วยเอนไซม์สามชนิดที่แตกต่างกันภายในบัฟเฟอร์เดียว เอนไซม์แต่ละตัวมีหน้าที่เฉพาะและเป็นเอกลักษณ์สำหรับปฏิกิริยา: T5 Exonuclease - สร้างส่วนที่ยื่นออกมาของ DNA 3 สายเดี่ยวโดยการเคี้ยวกลับจากปลาย DNA 5' ชิ้นส่วนดีเอ็นเอเสริมสามารถหลอมรวมเข้าด้วยกันได้ในภายหลัง

ในลักษณะนี้ การประกอบ Golden Gate ทำงานอย่างไร?

โกลเด้นเกท การโคลนนิ่งหรือ การประกอบ Golden Gate คือ วิธีการโคลนโมเลกุลที่ช่วยให้นักวิจัยสามารถประกอบชิ้นส่วนดีเอ็นเอหลายชิ้นพร้อมกันและในทิศทางในทิศทางเป็นชิ้นเดียวโดยใช้เอนไซม์จำกัด Type IIs และ T4 DNA ligase นี้ การประกอบคือ ดำเนินการในหลอดทดลอง

การโคลนเกตเวย์ทำงานอย่างไร

NS โคลนเกตเวย์ เทคโนโลยีขึ้นอยู่กับระบบการรวมตัวใหม่เฉพาะของไซต์ที่ใช้โดย phage l เพื่อรวม DNA ของมันใน E ไซต์ attL และ attR รอบ ๆ ไซต์ phage DNA ที่ถูกแทรกซ้ำโดยเฉพาะในระหว่างเหตุการณ์การตัดตอนเพื่อปฏิรูปไซต์ attP ใน phage l และ ไซต์ attB ใน E.