วีดีโอ: เอ็นไซม์จำกัดใช้อย่างไรเมื่อทำเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส?
2024 ผู้เขียน: Stanley Ellington | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-16 00:24
1 คำตอบ เพื่อตัด DNA, RNA หรือพลาสมิดที่ ข้อจำกัด ไซต์ (เช่น EcoRI, BamHI, hindIII และ BglII) เพื่อสร้างชิ้นส่วนทางพันธุกรรมที่มีขนาดเล็กลง ซึ่งสามารถแยกออกและมีลักษณะเฉพาะได้โดยใช้ เจลอิเล็กโทรโฟรีซิส.
ในทำนองเดียวกันอาจมีคนถามว่า เอ็นไซม์จำกัดมีหน้าที่อะไร?
NS เอนไซม์จำกัด เป็นโปรตีนที่จำแนกลำดับนิวคลีโอไทด์สั้นๆ จำเพาะ และตัด DNA ที่ตำแหน่งเฉพาะนั้นเท่านั้น ซึ่งเรียกว่า ข้อจำกัด ไซต์หรือลำดับเป้าหมาย ในแบคทีเรียที่มีชีวิต การทำงานของเอ็นไซม์จำกัด เพื่อป้องกันเซลล์จากการบุกรุกของแบคทีเรียไวรัส
นอกจากนี้ คุณรู้ได้อย่างไรว่าต้องใช้เอนไซม์จำกัดตัวใด? เมื่อเลือกเอ็นไซม์จำกัด คุณต้องเลือกเอ็นไซม์ที่:
- ขนาบเม็ดมีด แต่อย่าตัดด้านในเม็ดมีด
- อยู่ในตำแหน่งที่ต้องการในพลาสมิดผู้รับของคุณ (โดยปกติอยู่ใน Multiple Cloning Site (MCS)) แต่อย่าตัดที่อื่นบนพลาสมิด
นอกจากนี้ เอนไซม์จำกัดใช้ในการวิจัยอย่างไร?
ในห้องปฏิบัติการ เอนไซม์จำกัด (หรือ เอ็นโดนิวคลีเอสจำกัด ) เป็น ใช้แล้ว เพื่อตัด DNA ออกเป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อย การตัดจะทำในลำดับนิวคลีโอไทด์เฉพาะเสมอ แตกต่าง เอนไซม์จำกัด รับรู้และตัดลำดับดีเอ็นเอต่างๆ
บทบาทของเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสคืออะไร?
เจลอิเล็กโตรโฟรีซิส เป็นเทคนิคที่ใช้ในการแยกชิ้นส่วนดีเอ็นเอตามขนาด ตัวอย่าง DNA ถูกบรรจุลงในหลุม (เยื้อง) ที่ปลายด้านหนึ่งของa เจล และใช้กระแสไฟฟ้าดึงผ่าน เจล . ชิ้นส่วนดีเอ็นเอมีประจุลบ ดังนั้นพวกมันจึงเคลื่อนเข้าหาอิเล็กโทรดบวก