PCR การถอดความแบบย้อนกลับใช้ทำอะไร?

2024 ผู้เขียน: Stanley Ellington | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-16 00:24

RT - PCR ( ย้อนกลับ Transcriptase PCR ) RT - PCR เป็น ใช้แล้ว ในห้องปฏิบัติการวิจัยเพื่อศึกษาการแสดงออกของยีน เช่น ในการทดลองแยกเอ็กซอนออกจากอินตรอน และสามารถ ใช้แล้ว ทางคลินิกเพื่อวินิจฉัยโรคทางพันธุกรรมและติดตามการรักษาด้วยยา

เมื่อพิจารณาถึงสิ่งนี้ สิ่งที่จำเป็นสำหรับการถอดความแบบย้อนกลับคืออะไร

ที่จะเริ่มต้น การถอดความแบบย้อนกลับ , ย้อนกลับ transcriptases ต้องการ DNA oligonucleotide สั้น ๆ ที่เรียกว่าไพรเมอร์เพื่อผูกกับลำดับเสริมบนเทมเพลต RNA และทำหน้าที่เป็นจุดเริ่มต้นสำหรับการสังเคราะห์เส้นใยใหม่

นอกจากนี้ เหตุใดจึงสำคัญที่จะใช้ cDNA สำหรับ PCR cDNA มีเป็นของตัวเอง ความหมาย ใน ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส ( PCR ) เทคนิค cDNA เป็นผลมาจากการถอดรหัสแบบย้อนกลับโดยเอนไซม์ที่เรียกว่าการถอดรหัสแบบย้อนกลับ ตอนนี้เป็นสำเนาที่ถูกต้องของ จีโนม DNA , นี้ cDNA สามารถให้บริการ วัตถุประสงค์ ของแม่แบบ ดีเอ็นเอ สำหรับการขยายในหลอดทดลองและการวิเคราะห์ที่ตามมา

ด้วยวิธีนี้ PCR แบบเรียลไทม์และ PCR แบบย้อนกลับต่างกันอย่างไร

RT - PCR ใช้เพื่อขยายการถอดรหัสลับของรหัสดีเอ็นเอ QPCR วัดการขยาย 3. RT - PCR ใช้สำหรับการขยายเสียงในขณะที่ qPCR ใช้สำหรับการหาปริมาณ

cDNA มีสายคู่หรือไม่?

ต่างจาก RNA ตรงที่โมเลกุล DNA สามารถโคลนได้ง่าย (เรียกว่า ' cDNA โคลน') โดยการทำ cDNA สองเท่า - ติดอยู่ และผูกมัดกับดีเอ็นเอเวกเตอร์ การวิเคราะห์ลำดับของ DNA นั้นง่ายกว่าการวิเคราะห์ RNA มาก ดังนั้น cDNA เป็นรูปแบบที่จำเป็นในการวิเคราะห์ RNA โดยเฉพาะยูคาริโอต mRNA